Дифференцированное определение днк впч что это

Папилломавирусная инфекция — это заболевание, возбудителем которого является вирус папилломы человека (ВПЧ, папилломавирус).

Что провоцирует появление папилломавирусной инфекции?

Большинство пациентов, обратившихся в нашу клинику с ВПЧ, имеют ослабленный иммунитет. Одновременно человек может «носить» в себе сразу несколько разновидностей папилломавирусов, при этом, инфекционный процесс развивается скрыто. Но под действием определенных предрасполагающих факторов (беременности, половых контактов с людьми, имеющими остроконечные кондиломы, стрессов, хронических воспалительных процессов, травм, операций, контактов с радиоактивными источниками) развивается острая стадия инфекции.

Считается, что ВПЧ провоцирует рак шейки матки и является основной причиной смертности женщин от этого коварного заболевания.

Чаще всего папилломавирусная инфекция проявляется появлением остроконечных кондилом в области гениталий и возле анального отверстия.

При обнаружении образований в области половых органов и анального отверстия, похожих на бородавки, сразу же обращайтесь к специалистам.

Как диагностируют ВПЧ

Диагностика ВПЧ происходит с помощью следубщих процедур:

  • Кольпоскопия
  • Цитологическое исследование мазков
  • ПЦР-диагностика
  • Гистология тканей
  • Гинекологический осмотр.

Папилломавирусная инфекция часто развивается на фоне венерических заболеваний, воспалительных процессов в органах малого таза, инфекционных патологий.

Нашим специалистам доступны самые передовые методы диагностики, по результатам которых они могут поставить максимально достоверный диагноз и подобрать эффективную схему лечения.

Особенности лечения папилломавирусной инфекции

Лечение ВПЧ должно быть комплексным. Лечение назначается индивидуально, но обычно пациенты получают комбинированную терапию, включающую прием:

  • Противовирусных средств
  • Иммуностимулянтов
  • Противогрибковых препаратов
  • Местных средств, снимающих зуд, жжение, отек половых органов при наличии остроконечных кондилом.

В клинике активно применяются физиотерапевтические способы лечения.

Для удаления кондилом наши специалисты применяют малоинвазивные способы: криодеструкция, электрокоагуляция, лазеротерапия и др.

Медикаментозные методы борьбы с папилломавирусной инфекцией не обладают высокой эффективностью, так как ВПЧ способен вклиниваться в ДНК клеток и провоцировать развитие повторных инфекционных вспышек.

Для повышения результативности лечения мы практикуем индивидуальный подход к подбору методик, учитывая возраст пациентов, наличие дополнительных венерических заболеваний, усложняющих течение болезни, и многие другие факторы.

Мы стараемся совмещать иммуномодулирующую терапию, прием противовирусных препаратов с хирургическими или малоинвазивными способами удаления кондилом.

Особое внимание уделяется профилактическим мероприятиям. Для того, чтобы предотвратить случаи обострения папилломавирусной инфекции, необходимо максимально защитить себя от половых контактов с носителями ВПЧ и остроконечными кондиломами. Поддержка иммунитета позволит снизить риск рецидивирования инфекции и развития осложнений.

Врачи клиники Здоровье человека» приглашают Вас на консультацию. Мы находимся в районе м. Дубровка, ЮВАО, Москва.

Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (Вирус папилломы человека, Human papillomavirus, HPV) 21 типа ( 6, 11, 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 44, 45, 51 )

У вас есть родинки, бородавки, папилломы?

НЕ ПОДВЕРГАЙ СЕБЯ ОПАСНОСТИ! УДАЛИ ЛИШНЕЕ.

Удаление и лечение лазером растяжек, рубцов и кожных образований.

Безусловные плюсы лазерного удаления:

  • Удаление без разреза, крови и боли;
  • Отличный косметический эффект;
  • Быстрое выздоровление.


Все включено за 2150 руб.

*В стоимость входит — консультация специалиста, дерматоскопия, местное обезболивание, лазерное удаление кожного образования.

Лазерное лечение растяжек по зонам

При выборе любых вариаций лечения лазером — консультация бесплатно!
Скидки от 15% до 65%.

Важно! Срочно обратитесь к дерматологу, если кожа вокруг новообразования воспалилась, появился зуд или кровотечение.

Срок действия акции — до 31 октября 2018г.

В многопрофильной семейной клинике К медицина, проводится комплексная диагностика рака молочной железы по международным стандартам с использованием самых современных методов. Для наших пациентов это уникальная возможность получить доступ к лучшим методикам.

В акцию входит:

  • АНАЛИЗЫ НА ОНКОМАРКЕРЫ
  • УЗИ МОЛОЧНЫХ ЖЕЛЕЗ
  • ПРИЁМ ВРАЧА МАММОЛОГА (КАНДИДАТА МЕДИЦИНСКИХ НАУК)
  • РАСШИФРОВКА АНАЛИЗОВ

Стоимость:

Общая стоимость: 9 150 рублей 4 575 рублей

Боли в ногах!?
Тяжесть!? Жжение!? Отёчность!?
Сосудистые звездочки или уже более серьезные стадии варикоза!?


  • Беспокоят проблемы с ногами!?
  • Тяжесть!? Жжение!? Отёчность!? Боли в ногах!?
  • Сосудистые звездочки или уже более серьезные стадии варикоза!?

Наша клиника рада предложить Вам решение этих проблем!

  • Индивидуальный подход;
  • Врачи высшей категории;
  • Современные технологии лечения;
  • Быстрая реабилитация;
  • Амбулаторно и в условиях стационара

Что входит в стоимость акции:

  • Консультация врача флеболога — от 1.750 руб. 525 руб.
  • УЗИ вен нижних конечностей — 2.610 руб. 783 руб.

Итого: 4.360 руб.1.308 руб.

Акция действует до 31.10.2018 г.

Унылая пора! Очей очарованье!

Приятна мне твоя прощальная краса —

Автор: А.С. Пушкин

Наступила Осень — загадочное и незабываемое время года – художник, раскрашивающий природу в яркие цвета. Дуновения ветра и легкая прохлада окутывает Землю, воздух становится прозрачным. Осень прекрасна, и чтобы насладиться всеми красками в полной мере нужно защититься от ее извечного спутника – ГРИППА.

ПРИВИВКА – самый эффективный способ избежать заболевания!
В нашей клинике Вы и Ваши дети сможете БЕСПЛАТНО пройти ВАКЦИНАЦИЮ от гриппа! БУДЬТЕ ЗДОРОВЫ!

1) Осмотр терапевта или педиатра
2) Прививка от ГРИППА.

Сроки проведения акции: с 11.09.2018г. по 30.09.2018г.

Лазерное интимное омоложение в Москве по акции! Скидка 30%!

Необходимый результат уже после первой процедуры!

Это интересно:  Все о впч

Современные женщины все больше задумываются о своем здоровье и внешнем виде. Это касается не только лица или тела, но и интимных зон.

Поэтому клиника «К-Медицина» предлагает современную востребованную услугу лазерного омоложения интимной зоны. Лазерное омоложение обладает большим количеством преимуществ. В отличие от хирургических методик, данный способ безопасный и достаточно безболезненный. К тому же он отличается коротким восстановительным периодом и небольшим количеством противопоказаний.

Причины, по которым женщины прибегают к омоложению интимной зоны:

  • неприятные ощущения во время полового акта;
  • сухость влагалища;
  • наоборот, лишние выделения (выходящие за пределы нормы);
  • потеря чувствительности;
  • увеличение объёма влагалища;
  • растяжение слизистой и рубцы и шрамы;
  • потеря объёма половых губ, умеренные нарушения формы;
  • недоступность клитора;
  • недержание мочи (за исключением запущенных случаев);
  • невозможность достижения оргазма.

В зависимости от изначальной проблемы, необходимого результата можно достичь уже после первой процедуры. В ряде случаев требуется проведение 2-3 процедур. Проводят их с промежутком в два-три месяца. Эффект будет уже после первой процедуры.

Длительность:

В стоимость входит:

  • консультация врача;
  • местное обезболивание (если необходимо);

Противопоказания: Процедуру не проводят беременным и кормящим женщинам, при наличии венерических и онкологических заболеваний. Все противопоказания перед лазерной коррекцией уточняет лечащий врач.

Срок акции — по 31 октября 2018г.

№374С-УРО, Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (Вирус папилломы человека, Human papillomavirus, HPV), 4 типа (6, 11, 16, 18 )+ КВМ в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта

  1. Наличие папилломатозных разрастаний и изменений на слизистых оболочках половых органов.
  2. Контроль проводимой терапии;
  3. Скрининг специальных групп женщин.
  • женщины, имеющие в анамнезе рак шейки матки;
  • женщины в возрасте 25-65 лет, которым никогда не проводилось цитологическое исследование или проводилось более 3 лет назад;
  • женщины с кровотечением в репродуктивном периоде, кровотечениями после наступления менопаузы, посткоитальными кровотечениями.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

  1. В анализируемом образце биологического материала обнаружена ДНК, специфичная для вируса папилломы человека исследуемых типов в выявленной концентрации.
  1. В анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для вируса папилломы человека исследованных типов.
  2. Концентрация ДНК возбудителей в образце ниже границы чувствительности теста.
  • Профилактика рака шейки матки: Руководство для врачей. — М.: МЕДпресс-информ, 2008.
  • Полонская Н.Ю., Юрасова И.В., Сокольская Т.Ю. Преимущества и эффективность стандвртизации цитологических исследований в гинекологии // Клиническая лабораторная диагностика. — 2004. №11 с.47-50.
  • Bekkers R., Meijer C., et al. Effects of HPV detection in population-based screening programmers for cervical cancer: a Dutch moment // Gynecol. Oncol. 2006; Mar: 100(3):451-4.
  • Khan M., et al. The elevated 10-year risk of cervical precancer and cancer in women with human papillomavirus (HPV) type 16 or 18 and the possible utility of type specific HPV testing in clinical practice // J. nat. cancer inst. 2005; 97:1072-9.
  • Snijders J., Meijer C. The value of viral load in HPV detection in screening // HPV today 2006; 8:8-9.
  • ОСНОВНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
  • ПРИМЕРЫ РЕЗУЛЬТАТОВ

до 3 рабочих дней

*Указанный срок не включает день взятия биоматериала

Соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта

ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».

Примеры результатов на бланке*

*Обращаем ваше внимание на то, что при заказе нескольких исследований, на одном бланке могут быть отражены несколько результатов исследований.

В этом разделе вы можете узнать, сколько стоит выполнение данного исследования в вашем городе, ознакомиться с описанием теста и таблицей интерпретации результатов. Выбирая, где сдать анализ «Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (Вирус папилломы человека, Human papillomavirus, HPV), 4 типа (6, 11, 16, 18 )+ КВМ в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта» в Бишкеке и других городах России, не забывайте, что цена анализа, стоимость процедуры взятия биоматериала, методы и сроки выполнения исследований в региональных медицинских офисах могут отличаться.

Human Papillomavirus (HPV) высокого канцерогенного риска – скрининговое определение генотипов (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68) и генотипирование 16 и 18 типов [реал-тайм ПЦР, Roche Cobas 4800]

Исследование, направленное на обнаружение генетического материала (ДНК) вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска с генотипированием 16 и 18 типов вируса. Выявляется 14 генотипов ВПЧ на основе метода полимеразной цепной в режиме реального времени с мультиплексной детекцией (Roche Cobas 4800).

Синонимы русские

Вирус папилломы человека высокого канцерогенного риска; ВПЧ высокого канцерогенного риска; ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени, Roche Cobas 4800].

Синонимы английские

Human Papillomavirus; HPV; high carcinogenic risk; DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR, Roche Cobas 4800].

Какой биоматериал можно использовать для анализа?

Мазок смешанный из цервикального канала и поверхности шейки матки.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Женщинам рекомендуется сдавать мазок до менструации или через 2 дня после её окончания.

Общая информация об исследовании

Вирус папилломы человека (ВПЧ или HPV) представляет собой семейство ДНК-содержащих вирусов, являющихся причиной различных поражений кожи и слизистых оболочек человека. Известно более 100 типов ВПЧ, которые могут быть ассоциированы с появлением бородавок, папиллом, остроконечных и плоских кондилом, предраковых изменений (дисплазий) и рака шейки матки, влагалища, вульвы, рака прямой кишки, полового члена и новообразований некоторых других локализаций (например, орофарингеальной карциномы). Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Основным путем передачи инфекции является половой путь. Возможно также заражение через бытовые предметы общего пользования и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов.

Это интересно:  Из за кондилом роды кесарево

Различают генотипы ВПЧ, инфицирование которыми приводит к развитию доброкачественных процессов, и тех, которые обладают высоким риском злокачественного перерождения. Генотипы ВПЧ 1, 2, 3, 4, 5, 10, 28, 49 относятся к неонкогенным; генотипы 6, 11, 13, 32, 34, 40, 41, 42, 43, 44 имеют низкий онкогенный риск; генотипы 26, 30, 53, 65 обладают средним онкогенным риском; генотипы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, относятся к ВПЧ высокого канцерогенного риска и 66, 68 относятся к типам вероятного риска для человека. В составе генома онкогенных типов ВПЧ имеются участки, ответственные за синтез определенных белков. Онкопротеины Е6 и Е7 подавляют процессы апоптоза (запрограммированной клеточной гибели) в клетках с измененным генетическим материалом. Они играют большую роль в развитии злокачественного опухолевого процесса. Участки генома L1 и L2 ответственны за синтез структурных белков капсидной оболочки вируса.

Инфицирование высокоонкогенными типами ВПЧ может быть ассоциировано с развитием цервикальной интраэпителиальной неоплазии (ЦИН/CIN) и рака шейки матки у женщин. Рак шейки матки занимает третье место в структуре заболеваемости женщин России злокачественными новообразованиями. В большинстве случаев, в 90 %, онкологический процесс представлен плоскоклеточной карциномой, реже – другими гистологическими вариантами (аденокарцинома и аденоплоскоклеточная карцинома). Длительная персистенция вируса и высокий уровень его содержания может быть ассоциирован с тяжестью заболевания.

Использование комбинированной диагностики (цитологического исследования и ДНК-тестирования) повышает эффективность обнаружения предраковых состояний, ЦИН 2 и 3 степени выраженности, рака шейки матки.

К современным методам диагностики относится метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (реал-тайм ПЦР). Полимеразная цепная реакция – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал исследуемого возбудителя. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

Анализатор и тест-система Roche Cobas 4800 сочетает в себе автоматизированную подготовку проб для исследования и обнаружение 14 генотипов ВПЧ на основе метода ПЦР в режиме реального времени с мультиплексной детекцией. Это позволяет генотипировать и определять наличие ВПЧ 16 и ВПЧ 18 типов, а также пул из 12 типов ВПЧ высокого канцерогенного риска (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68). В качестве внутреннего контроля реакции используется β-глобин человека. Использование метода реал-тайм ПЦР Roche Cobas 4800 для скринингового определения генотипов ВПЧ высокого канцерогенного риска является рекомендованным, апробированным и клинически проверенным. Применение данного диагностического метода позволяет одновременно генотипировать вирус на ВПЧ 16 и ВПЧ 18. Данные типы вируса относятся к наиболее канцерогенным и ассоциированным с клинически значимым риском развития ЦИН 3 степени или рака шейки матки. Генотип ВПЧ 16 чаще встречается при плоскоклеточной карциноме, а ВПЧ 18 при аденокарциноме. Таким образом, возможно выявление генотипов ВПЧ высокого канцерогенного риска, прогнозирование риска развития инфекции, ЦИН и рака шейки матки, а также определение тактики, контроля проводимой терапии и оценки возможности развития рецидива после лечения.

Для чего используется исследование?

  • Для оценки риска развития процессов и заболеваний, ассоциированных с ВПЧ: цервикальной интраэпителиальной неоплазии (ЦИН 2 и 3 степени выраженности) и рака шейки матки, влагалища, вульвы, рака прямой кишки, орофарингеальной карциномы;
  • Для скрининговой диагностики генотипов ВПЧ высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68);
  • Для дифференциальной диагностики и генотипирования ВПЧ 16 и 18, с определением концентрации ДНК данных типов вируса;
  • Для мониторинга инфекции, вызванной ВПЧ, и прогнозирования ее течения;
  • Для контроля за эффективностью лечения предраковых заболеваний, ассоциированных с ВПЧ;
  • Для определения тактики, контроля проводимой терапии и оценки возможности развития рецидива после лечения

Когда назначается исследование?

  • При клинических проявлениях и подозрении на развитие онкологического процесса аногенитальной области;
  • При наличии кондилом, бородавок половых путей и других морфологических изменений эпителия различных локализаций;
  • При скрининге рака шейки матки у женщин старше 30 лет в рамках комбинированной диагностики (цитологического исследования и ДНК-тестирования методом полимеразной цепной реакции);
  • При выявлении ВПЧ неуточненного генотипа;
  • При выявлении цитологических изменений в мазке на атипию, при цитологическом исследовании мазка по Папаниколау, в гистологическом препарате;
  • При наблюдении за инфицированными ВПЧ;
  • При лечении рака и предраковых состояний, ассоциированных с ВПЧ;
  • При определении тактики, контроля проводимой терапии и оценки возможности развития рецидива после лечения.

Дифференцированное определение днк впч что это

Большая группа папилломавирусов стала эффективно изучаться сравнительно недавно. Побудительная причина интенсивного изучения этих вирусов связана с тем, что некоторые из них ассоциируются с возникновением злокачественных опухолей аногенитальной области. Среди опухолей генитальной локализации особое место занимает рак шейки матки, вирусная этиология которого доказана целым рядом эпидемиологических исследований и подтверждена присутствием в ткани опухоли ДНК определенных типов вирусов папилломы человека (ВПЧ).

ВПЧ — мелкие ДНК-содержащие вирусы, характерная особенность которых заключается в способности вызывать пролиферацию эпителия кожи и/или слизистых оболочек. ВПЧ не размножаются в культуре клеток, поэтому сведения о биологии вирусов получены с помощью молекулярно-генетических технологий и эпидемиологических исследований. Показано существование 100 типов, отличающихся по строению ДНК, 75 из них молекулярно клонированы и полностью секвенированы. Типирование ВПЧ основано не на антигенных различиях, а на ДНК-гомологии.

Среди 30 типов ВПЧ, которые поражают аногенитальную область, различают типы высокого и низкого онкогенного риска. ВПЧ обнаруживают в 93% случаев инвазивного рака аногениталий, при этом 50% из них — ВПЧ 16.

Это интересно:  Днк впч 33 у мужчин

Установлен половой путь передачи ВПЧ. Вследствие частого бессимптомного пребывания ВПЧ в организме инфицированные люди зачастую не знают о том, что они инфицированы. Недавно появившиеся генитальные бородавки более инфекционны, чем давно существующие.

Резкое снижение иммунитета, наблюдаемое при СПИДе, при лечении цитотоксическими препаратами, сопровождается реактивацией латентной папплломавирусной инфекции, что клинически проявляется в виде образования множественных папилломатозных разрастании.

Как происходит репликация вируса, сборка вирусных частиц и их высвобождение из клетки, считать полностью установленными еще нельзя. Известны 2 способа репликации — постоянная репликация эписомного генома в базалыюм слое эпителия и вегетативная репликация в более дифференцированных клетках гранулярного слоя. Репликация эписомного генома происходит постоянно, но количество копий ДНК низкое. Вегетативная репликация происходит в ядрах клеток, где генерируется потомство ВПЧ. Высвобождение вирусных частиц происходит в результате дегенерации десквамированных клеток.

По мере изучения ВПЧ гибридизационными методами расширяется круг вирусов высокого онкогенного риска. Это ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68. Вирусами низкого онкогенного риска остаются 5 типов ВПЧ — 6, 11, 42, 43, 44. ВПЧ 16 наиболее часто встречается в ткани плоскоклеточного рака шейки матки, ВПЧ 18 — в ткани железистого рака — аденокарциномы.

В табл. 6.7 приведены типы ВПЧ, обнаруживаемые при различных поражениях кожи и слизистых оболочек.

Типы ВПЧ, обнаруженные при различных поражениях кожи и слизистых оболочек
(Villiers Е. М., 1989)

Применение методов определения ДНК ВПЧ повышает эффективность выявления предраковых состояний, во-первых, потому, что чувствительность методов чрезвычайно высока, их предсказательный уровень неизмеримо выше, чем цитологического метода; во-вторых, стандартизация молекулярно-биологическпх методов достижима, в то время как цитологические исследования с трудом можно привести к одному стандарту.

Комбинированное обследование пациентов цитологическими и молекулярно-биологическимн методами позволяет выявить интраэпителиальную неоплазию и наличие ВПЧ высокого и низкого онкогенного риска. В лабораторной диагностике ВПЧ-инфекций применяют исключительно молекулярно-биологические методы. Существует три основных категории определения ДНК ВПЧ: неамплификационные, амплификационные и сигнальные амплификационные.

Неамплификационные методы в обычной диагностической практике в настоящее время не применяются, они используются в научных целях.

В табл.6.8 приводятся основные молекулярно-биологические методы, используемые для определения ДНК ВПЧ.

Методы обнаружения ДНК ВПЧ

Амплификационные методы, целью которых является выявление характерных для типа ВПЧ олигонуклеотидов в исследуемом материале и умножение их количества с помощью ПЦР или ЛЦР, называют амплификацией мишени. В мире используется несколько стандартных реактивов для всех типов ВПЧ, в нашей стране практически используются праймеры лабораторного приготовления.

Не останавливаясь подробно на мишень-амплифицирующих методах, обратимся к сигнальным амплификационным методам, которые не требуют ограничений в лабораторной практике, характерных для ПЦР-лабораторий.

Система двойной генной ловушки — «Hybrid Capture II» фирмы Abbott (США), применяется без тех ограничений, которые необходимы при использовании ПЦР. Она обеспечивает:

  • компьютерную интерпретацию результатов, что исключает субъективизм в оценке;
  • воспроизводимость и достоверность результатов;
  • полный цикл исследования за один день.

Система «Digene Hybrid Capture II» использует РНК-ДНК гибридизацию в растворе с последующей «хвостовой» иммунологнческой реакцией между гибридом РНК пробы — ДНК мишени и специфическими антителами к этому гибриду. Тест обязан своей высокой специфичностью нескольким независимым составляющим.

Во-первых, мишенью является весь геном ВПЧ. Длинная одноцепочечная РНК эффективно гибридизируется со всеми 8000 нуклеотидов ДНК ВПЧ. Гибрид ДНК-РНК более стабилен, что позволяет избежать нежелательных побочных реакций.

Во-вторых, источником дополнительной чувствительности реакции является использование антител к РНК-ДНК гибриду, конъюгированных с множеством молекул щелочной фосфатазы. Эти меченые антитела распознают короткие цепочки РНК-ДНК гибрида способом, который не имеет отношения к последовательностям нуклеотидов ДНК и РНК. Тысячи молекул антител могут покрыть единичный геномный гибрид ДНК ВПЧ.

В-третьих, каждый иммобилизованный энзим щелочной фосфатазы реагирует с множеством молекул хемилюминесцента диоксетана за 1 минуту и вызывает постоянный поток фотонов, которые подсчитываются фотомультиплейерной трубкой люминометра.

В-четвертых, система генной ловушки имеет преимущество перед естественной амплификацией, так как вовлекает большой объем (10-20%) клинического материала в реакцию.

В гибридной ловушке используются РНК-пробы, комплементарные к полной геномной последовательности 13 канцерогенных и 5 типов ВПЧ низкого онкогенного риска. Составляются «коктейли» высокого и низкого риска соответственно. Каждый «коктейль» отдельно инкубируется с денатурированной (одноцепочечной) ДНК из клинического материала. Образующимся РНК-ДНК гибрид переносится в лунки микропанели, на которых иммобилизованы моноклональные антитела к РНК-ДНК гибриду. Антитела специфически распознают гибрид, который прикрепляется к лунке панели. Уловленные таким образом РНК-ДНК гибриды затем вступают в реакцию с моноклональными антителами к гибриду, меченными щелочной фосфатазой, вносимыми в каждую лунку. Избыток антител и негибридизированных молекул удаляют промыванием. В лунки добавляют люминесцирующий субстрат диоксетан. Если субстрат разрушается щелочной фосфатазой, то происходит испускание света. Эмиссию света можно измерить с помощью люминометра. Количество света генерируется в пропорции к числу мишеней ДНК в образце.

Аналитическая чувствительность системы — 0,2 пг/мл (1000 копий генома ВПЧ).

Определение ВПЧ с использованием «Digene Hybrid Capture II» служит эффективным дополнением к цервикальной цитологии и может помочь снизить заболеваемость и смертность от цервикального рака.

Статья написана по материалам сайтов: chh.ru, k-medica.ru, invitro.kg, helix.ru, bono-esse.ru.

»

Помогла статья? Оцените её
1 Star2 Stars3 Stars4 Stars5 Stars
Загрузка...
Добавить комментарий

Adblock detector